Poster Session (P67-P100)

[P84] Combination of cpHaloTag and bio-orthogonal two-step labeling for trafficking studies of transmembrane proteins.

*Jun Ikeshita¹, Yutaro Sugihara¹, Shigeki Kiyonaka¹ (1. Graduate School of Engineering, Nagoya University)

Keywords:

Transmembran protein,Two-step labeling,Imaging,Protein tag,Circular permutation

細胞膜タンパク質の追跡には高い時間・空間分解能での解析が可能なタンパク質タグが広く利用され，その代表例としてHaloTagが挙げられる．しかし，HaloTagは標的タンパク質のN末かC末に入れることが多く，細胞外ループに導入するとタンパク質に対し摂動が加わる懸念がある．本研究は，HaloTag本来のN, C末をリンカーでつなぎ，新たにN, C末をつくり出したcpHaloTagを膜タンパク質の細胞外ループに融合し，タンパク質への摂動を最小限に留めることに成功した．