The 130th Annual Meeting of Japanese Society of Animal Science
Sep 14 - Sep 17, 2022Tokyo University Of Agriculture
The 130th Annual Meeting of Japanese Society of Animal Science
Sep 14 - Sep 17, 2022Tokyo University Of Agriculture
[IIIYS-05]乳酸菌のsmall RNA ffs-LはJAK-STAT経路を介してマクロファージのサイトカイン産生を抑制する
*Yuki Nakashima1, Kotone Onuki2, Yudai Fukuchi2, Hibi Tomoyuki2, Shin Yasuda1,2, Hideki Kinoshita1,2(1. Tokai Univ. Graduate School of Bioscience, 2. Tokai Univ. School of Agriculture)
【目的】 タンパク質をコードしないsmall RNA（sRNA）の機能が注目されているが乳酸菌のsRNAについては殆ど分かっていない。そこで本研究では乳酸菌のsRNAが宿主の免疫細胞に与える影響を明らかにすることを目的とした。
【方法】 18hおよび36h培養したPediococcus pentosaceus TOKAI 10m(TK 10m)のsRNAをマクロファージ細胞に添加し、ELISA法でサイトカイン量、ウェスタンブロッティングにて転写活性因子を評価した。また、同定したsRNA配列によるサイトカイン産生抑制と、リアルタイムPCRで標的予測遺伝子の発現を評価した。
【結果と考察】 Total sRNA添加でIL-6とIL-10の濃度依存的な抑制が確認され(p<0.05)、36h培養ではSTAT3とERKのリン酸化の有意な抑制が確認された(p<0.01)。さらに、sRNA ffsの断片配列(ffs-L)添加でIL-6とIL-10の抑制が(p<0.01)、Total sRNA添加でAgo-2の増加とGm-csfの抑制が確認された(p<0.01)。本結果よりffs-LがAGO2を介してGm-csfとJAK-STAT経路を抑制し、サイトカイン産生を抑制する可能性が示された。本試験で初めて乳酸菌sRNAの免疫調節作用とその作用分子が明らかとなった。
【方法】 18hおよび36h培養したPediococcus pentosaceus TOKAI 10m(TK 10m)のsRNAをマクロファージ細胞に添加し、ELISA法でサイトカイン量、ウェスタンブロッティングにて転写活性因子を評価した。また、同定したsRNA配列によるサイトカイン産生抑制と、リアルタイムPCRで標的予測遺伝子の発現を評価した。
【結果と考察】 Total sRNA添加でIL-6とIL-10の濃度依存的な抑制が確認され(p<0.05)、36h培養ではSTAT3とERKのリン酸化の有意な抑制が確認された(p<0.01)。さらに、sRNA ffsの断片配列(ffs-L)添加でIL-6とIL-10の抑制が(p<0.01)、Total sRNA添加でAgo-2の増加とGm-csfの抑制が確認された(p<0.01)。本結果よりffs-LがAGO2を介してGm-csfとJAK-STAT経路を抑制し、サイトカイン産生を抑制する可能性が示された。本試験で初めて乳酸菌sRNAの免疫調節作用とその作用分子が明らかとなった。