講演情報
[P-72]マウスの口腔顎顔面領域におけるTRPM8の発現局在解析
*久本 芽璃1、黒嶋 伸一郎1 (1. 北海道大学大学院歯学研究院冠橋義歯・インプラント再生補綴学教室)
【目的】
TRPM8は，温度や機械的刺激等に反応性を示すTRPチャネルの一種で，一部の感覚神経に発現する1)が，口腔顎顔面領域の局在と機能は不明である．本研究の目的は，作製したTRPM8に対する抗体の特異性を検証し，口腔顎顔面領域のTRPM8局在を解析することにある．
【方法】
野生型（WT）マウスとTrpm8GFP/GFPマウスで抗TRPM8抗体の特異性を確認後，WTマウスとTrpm8GFP/GFPマウスの舌組織を用いて抗TRPM8抗体とGFPの分布発現を検証した．また，Trpm8GFP/GFPマウスでGFP陽性線維の走行を3次元的に解析し，WTマウスでTRPM8と神経細胞特異的マーカーPGP9.5の局在を検索した．さらにTrpm8GFP/GFPマウスの歯槽骨で，歯の萌出時期の違いがGFP発現に与える影響を解析した．
【結果と考察】
抗TRPM8抗体はWTマウスの茸状乳頭に陽性反応を示し，Trpm8GFP/GFPマウスではシグナルが消失したことから，抗体の特異性が確認された．舌組織において，WTマウスでは抗TRPM8抗体が，また，Trpm8GFP/GFPマウスではGFPが味蕾周囲線維に陽性反応を示していた．さらにTrpm8GFP/GFPマウスの3次元的解析から，GFP陽性線維は味蕾を取り囲むが，内部組織に侵入しないことが分かった．以上から，TRPM8陽性線維は味細胞と直接的な関係性がないと考えられたが，WTマウスでTRPM8とPGP9.5が部分的に共発現したことから，TRPM8陽性線維は神経線維である可能性が高いと考えられた．一方，Trpm8GFP/GFPマウス歯槽骨では歯の萌出時期にGFP陽性細胞が確認されたが，抜歯後では非抜歯側でGFP陽性細胞が発現し，抜歯側で発現が認められなかった．以上より，TRPM8は咬合力による機械的刺激を感知し，歯槽骨では侵害受容器として機能する可能性が考えられた．顎骨の機械的刺激感知機構の解明は，抜歯後の歯槽堤吸収抑制の一助となるかもしれない．
【参考文献】
1) Acharya TK, Kumar S, Tiwari N, et al. TRPM8 channel inhibitor-encapsulated hydrogel as a tunable surface for bone tissue engineering. Sci Rep 2021; 12;11(1):3730.
TRPM8は，温度や機械的刺激等に反応性を示すTRPチャネルの一種で，一部の感覚神経に発現する1)が，口腔顎顔面領域の局在と機能は不明である．本研究の目的は，作製したTRPM8に対する抗体の特異性を検証し，口腔顎顔面領域のTRPM8局在を解析することにある．
【方法】
野生型（WT）マウスとTrpm8GFP/GFPマウスで抗TRPM8抗体の特異性を確認後，WTマウスとTrpm8GFP/GFPマウスの舌組織を用いて抗TRPM8抗体とGFPの分布発現を検証した．また，Trpm8GFP/GFPマウスでGFP陽性線維の走行を3次元的に解析し，WTマウスでTRPM8と神経細胞特異的マーカーPGP9.5の局在を検索した．さらにTrpm8GFP/GFPマウスの歯槽骨で，歯の萌出時期の違いがGFP発現に与える影響を解析した．
【結果と考察】
抗TRPM8抗体はWTマウスの茸状乳頭に陽性反応を示し，Trpm8GFP/GFPマウスではシグナルが消失したことから，抗体の特異性が確認された．舌組織において，WTマウスでは抗TRPM8抗体が，また，Trpm8GFP/GFPマウスではGFPが味蕾周囲線維に陽性反応を示していた．さらにTrpm8GFP/GFPマウスの3次元的解析から，GFP陽性線維は味蕾を取り囲むが，内部組織に侵入しないことが分かった．以上から，TRPM8陽性線維は味細胞と直接的な関係性がないと考えられたが，WTマウスでTRPM8とPGP9.5が部分的に共発現したことから，TRPM8陽性線維は神経線維である可能性が高いと考えられた．一方，Trpm8GFP/GFPマウス歯槽骨では歯の萌出時期にGFP陽性細胞が確認されたが，抜歯後では非抜歯側でGFP陽性細胞が発現し，抜歯側で発現が認められなかった．以上より，TRPM8は咬合力による機械的刺激を感知し，歯槽骨では侵害受容器として機能する可能性が考えられた．顎骨の機械的刺激感知機構の解明は，抜歯後の歯槽堤吸収抑制の一助となるかもしれない．
【参考文献】
1) Acharya TK, Kumar S, Tiwari N, et al. TRPM8 channel inhibitor-encapsulated hydrogel as a tunable surface for bone tissue engineering. Sci Rep 2021; 12;11(1):3730.