Even (2P-002~2P-048)

[2P-006] Development of unmethylated CpG detection method using unmethylated CpG binding domain fused luciferase constructed by SnoopCatcher/SnoopTag system

*Takamichi Miyata¹, Hazuki Shimamura¹, Wataru Yoshida¹ (1. Graduate School of Bionics, Tokyo University of Technology)

Keywords:

DNA methylation level,Bioluminescence resonance energy transfer,Unmethylated CpG binding domain,Luciferase,Protein ligation system

蛋白質ライゲーションシステムSnoopCatcher/SnoopTagを用い、任意の組み合わせで修飾塩基認識蛋白質融合ルシフェラーゼを構築する方法を開発することを目的とした。非メチル化CpG結合蛋白質にSnoopTagを、ルシフェラーゼにSnoopCatcherを融合させた。このライゲーション産物をゲノムDNAに結合させ、ルシフェラーゼの発光によりDNAインターカレーターを励起した結果、この蛍光強度はゲノムDNAの非メチル化CpG量に依存することが示された。