Even (2P-002~2P-048)

[2P-014] The construction strategy of AFP-based biosensors using the putative structural change

*Shunsuke Tajima¹, Eiji Nakata¹, Reiko Sakaguchi², Masayuki Saimura¹, Yasuo Mori³, Takashi Morii¹ (1. Institute of Advanced Energy, Kyoto University, 2. School of Medicine, University of Occupational and Environmental Health, 3. Graduate School of Engineering, Kyoto University)

Keywords:

Fluorescent protein,Biosensor,Conformational change,Nitric oxide,TRPC5

構造情報が得られていないタンパク質を元に蛍光タンパク質を用いたバイオセンサーを構築する設計法が必要である。過去に、TRPC5チャネルの構造変化が予想される部位を、緑色蛍光タンパク質 (EGFP)に導入することで微小な蛍光変化として検出していた。本研究では細胞でのセンサーとしての使用のため、in silicoとin vitroによる二段階のスクリーニングを行い、より大きな蛍光変化を示す3種類の変異体を得ることができた。