Presentation Information
[P004]Characterization and Chromogenic Behavior of Enzyme-Encapsulated Polysaccharide Gel Designed for Colorimetric Analysis
*Yumeka Yamanaka1, Nobuaki Soh1,2 (1. Faculty of Agriculture, Saga University, 2. The United Graduate School of Agricultural Sciences, Kagoshima University)
Keywords:
Alginate Gel Beads,Enzyme,Colorimetric Analysis,Chromogenic Behavior
【目的】
酵素反応を活用した比色分析法は選択性や簡便性に優れるという特徴を持つ．当研究グループでは，ゲル内に酵素と分析用基質を共内包した材料の開発と分析系構築への応用に取り組んできた．本研究では，酵素と比色分析用の基質をアルギン酸ゲルに共内包したゲル材料を作製し，この多糖ゲル材料の物性が当該ゲル材料における発色挙動に及ぼす影響を検討した．
【方法】
アルギン酸ナトリウム，西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP），3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine（TMBZ）を含む溶液を調製した．調製した溶液を，シリンジポンプを用いて，濃度の異なる乳酸カルシウム溶液（0.5％，1％，2％，4％）に滴下し，HRPとTMBZを含有した球状のアルギン酸ゲルビーズ材料を4種類作製した．得られたゲルビーズ材料を，過酸化水素を含む酢酸バッファーに浸漬し，発色状況の経時変化を調査した．また，アルギン酸ゲルビーズ材料の物性測定を行い，ゲルビーズ材料の物性と発色挙動の関係性について検討した．
【結果】
得られたHRP/TMBZ含有アルギン酸ゲルビーズ材料を過酸化水素/酢酸バッファー混合溶液に浸漬したところ，作製時における乳酸カルシウム濃度が異なる4種類のゲルビーズ材料の何れにおいても，時間経過に伴い発色反応が進行し，青緑色が濃くなる様子が観測された．また，各ゲルビーズ材料内における発色度は均一ではなく，ビーズの外殻側が強く発色しているように見受けられた．加えて，作製時に使用した乳酸カルシウム濃度が高くなるにつれて，時間経過に伴い，過酸化水素/酢酸バッファー混合溶液が，黄色に染まっていく様子も観測された．一方，物性測定の結果，作製時の乳酸カルシウム濃度が高いほど，ゲル材料の破断荷重は大きくなった．これらの結果から，ゲル材料がかたい程，HRPが触媒する発色反応はゲルビーズの外殻付近で進行していることが示唆された．
酵素反応を活用した比色分析法は選択性や簡便性に優れるという特徴を持つ．当研究グループでは，ゲル内に酵素と分析用基質を共内包した材料の開発と分析系構築への応用に取り組んできた．本研究では，酵素と比色分析用の基質をアルギン酸ゲルに共内包したゲル材料を作製し，この多糖ゲル材料の物性が当該ゲル材料における発色挙動に及ぼす影響を検討した．
【方法】
アルギン酸ナトリウム，西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP），3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine（TMBZ）を含む溶液を調製した．調製した溶液を，シリンジポンプを用いて，濃度の異なる乳酸カルシウム溶液（0.5％，1％，2％，4％）に滴下し，HRPとTMBZを含有した球状のアルギン酸ゲルビーズ材料を4種類作製した．得られたゲルビーズ材料を，過酸化水素を含む酢酸バッファーに浸漬し，発色状況の経時変化を調査した．また，アルギン酸ゲルビーズ材料の物性測定を行い，ゲルビーズ材料の物性と発色挙動の関係性について検討した．
【結果】
得られたHRP/TMBZ含有アルギン酸ゲルビーズ材料を過酸化水素/酢酸バッファー混合溶液に浸漬したところ，作製時における乳酸カルシウム濃度が異なる4種類のゲルビーズ材料の何れにおいても，時間経過に伴い発色反応が進行し，青緑色が濃くなる様子が観測された．また，各ゲルビーズ材料内における発色度は均一ではなく，ビーズの外殻側が強く発色しているように見受けられた．加えて，作製時に使用した乳酸カルシウム濃度が高くなるにつれて，時間経過に伴い，過酸化水素/酢酸バッファー混合溶液が，黄色に染まっていく様子も観測された．一方，物性測定の結果，作製時の乳酸カルシウム濃度が高いほど，ゲル材料の破断荷重は大きくなった．これらの結果から，ゲル材料がかたい程，HRPが触媒する発色反応はゲルビーズの外殻付近で進行していることが示唆された．
Comment
To browse or post comments, you must log in.Log in