[P001-P057] Poster Presentation Awards / International Poster Award for Young Researcher

[P054] A study of biological activity of Shiikuwasha seed extract and intestinal absorption property of limonoids.

*Sakura KOYAMA¹, Miyu ETO², Yoshiaki NAGASAWA², Wataru KOBAYASHI³, Hanoya TAMURA¹, Sana MURATA¹, Moe NISHIMURA¹, Noriyuki NATSUME⁴, Je-Tae WOO⁵, Akio WATANABE^1,2 (1. Jumonji University, Faculty of Human Life, 2. Jumonji University, Graduate School of Human Life , 3. Komazawa Women's University, Human Health, 4. NatuPharma Ryukyus, 5. Chubu University, College of Bioscience and Biotechnology)

Keywords:

Shiikuwasha seed extract,limonoids,limonin,Nomilin

【目的】シークヮーサー（Citrus depressa）は，沖縄県で盛んに栽培されている柑橘類で，種子にはリモニンやノミリンなどのリモノイドを含むのが特徴である．シークヮーサー種子の多くは廃棄されており，有効活用法が検討されている．そこで我々はリモノイドを高純度化したシークヮーサー種子エキス（SSE）を製造し，SSEの生理活性と各リモノイドの腸管吸収特性を評価したので報告する．

【方法】SSEの抗炎症作用を評価するために，マウスマクロファージ様細胞株RAW264を用いてLPSによって上昇した一酸化窒素（NO）産生を指標に評価した．次にSSEの抗皮膚老化作用を評価するために，正常ヒト皮膚線維芽細胞（HDF）を用いてIL-1α刺激により上昇したエラスターゼ活性を評価した．最後に，リモノイドの腸管吸収特性を評価するために，9週齢の雄性Wister系ラットから小腸を採取し，トライツじん帯の下部から8 ㎝毎に小腸を切断し反転させた．反転腸管内液としてクレブス‐ヘンゼライトバッファー0.4 mLを注入し腸管の両端を糸で結紮した．50 µⅯリモニンまたはノミリンを添加したクレブス‐ヘンゼライトバッファー20 mLに結紮した反転腸管を吊るし，20分間加温した．採取した反転腸管内液についてLC-MSを用いて透過量を定量した． 　

【結果】RAW264細胞における検討では，SSEがLPS刺激により上昇したNO産生を抑制した．HDF細胞における検討では，SSEがILｰ1α刺激により上昇したエラスターゼ活性を抑制した．これらの結果からSSEには生体内や皮膚における過剰な炎症反応を抑制する効果が示唆された．反転腸管吸収モデルにおける検討では，リモニンの腸管吸収性はノミリンより高かった．今後はSSEの作用機序の解明，新規機能性の探索，リモノイドの腸管や肝臓などにおける代謝動態や排出機構を検討していく予定である．