講演情報
[P140]低温増殖性芽胞形成細菌に感染するバクテリオファージの分離と性状
*髙田 冴花1、山木 将悟1、山﨑 浩司1 (1. 北大院水産)
キーワード：
バクテリオファージ、芽胞形成細菌、Paenibacillus属細菌
【目的】コールドチェーンの発達に伴い，低温増殖性細菌による食品の腐敗・変敗が問題となっている．芽胞形成細菌であるPaenibacillus属には，低温で高い増殖能力を示す種が知られており，効果的な制御法の確立が必要である．本研究では，バクテリオファージ（ファージ）とファージ由来溶菌酵素の応用による制御法の確立を目的とし，P. terraeに感染するファージを分離し，その性状分析とゲノム解析を行った．
【方法】P. terrae No.9を供試菌株とし，Tryptic Soy Brothを用いて30℃で18 h培養後，実験に供した．P. terraeに感染する4株のファージ（PT2～PT5）を土壌から分離し，当研究室で過去に分離されたファージPT1と共に宿主域とプラークサイズに及ぼす二価カチオンの影響を調べた．さらに，ファージPT1，PT2，PT4は，透過型電子顕微鏡（TEM）観察と一段増殖試験を行い，ファージPT2とPT4についてはゲノム解析を行った．
【結果】宿主域分析の結果，いずれのファージもP. terrae 2株とP. polymyxa 1株にプラークを形成した．また，各ファージは二価カチオンの添加によりプラークサイズが増大したため，二価カチオンにより感染が増強されることが示唆された．TEM観察の結果，はいずれも頭部と非収縮性の尾部からなる構造であった．一段増殖試験ではいずれのファージも潜伏期が90分間となり，類似したファージであることが示唆された．ゲノム解析により，PT2とPT4はそれぞれゲノムサイズ約64 kbp，約66 kbpの新種のファージであることが明らかとなり，溶菌酵素をコードすると予想される遺伝子の存在も確認した．以上より，本研究ではPaenibacillusファージを微生物制御へ活用するための一助となる知見を得た．
【方法】P. terrae No.9を供試菌株とし，Tryptic Soy Brothを用いて30℃で18 h培養後，実験に供した．P. terraeに感染する4株のファージ（PT2～PT5）を土壌から分離し，当研究室で過去に分離されたファージPT1と共に宿主域とプラークサイズに及ぼす二価カチオンの影響を調べた．さらに，ファージPT1，PT2，PT4は，透過型電子顕微鏡（TEM）観察と一段増殖試験を行い，ファージPT2とPT4についてはゲノム解析を行った．
【結果】宿主域分析の結果，いずれのファージもP. terrae 2株とP. polymyxa 1株にプラークを形成した．また，各ファージは二価カチオンの添加によりプラークサイズが増大したため，二価カチオンにより感染が増強されることが示唆された．TEM観察の結果，はいずれも頭部と非収縮性の尾部からなる構造であった．一段増殖試験ではいずれのファージも潜伏期が90分間となり，類似したファージであることが示唆された．ゲノム解析により，PT2とPT4はそれぞれゲノムサイズ約64 kbp，約66 kbpの新種のファージであることが明らかとなり，溶菌酵素をコードすると予想される遺伝子の存在も確認した．以上より，本研究ではPaenibacillusファージを微生物制御へ活用するための一助となる知見を得た．
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